认识并解读色谱图

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     如果你是一名初学者，下面的文章对你来说是最重要的，而且如果你想正确地维护在线色谱，下面的文章将引导你走向正确的方向。那么，这是为什么呢？首先，我们先弄清楚一个概念，什么叫色谱图。
     色谱图：由色谱柱流出物通过检测器及信号处理系统产生连续的响应信号在记录仪上体现出随时间和信号强度不同而变化的轨迹。完整的一个运行周期所产生的轨迹集合就是一个运行周期的色谱图。
    在线色谱的色谱图是全面体现色谱柱效、柱切阀动作状态、载气控制系统、柱温控制系统、检测器灵敏度、信号处理系统、分析方法设定、积分事件设定等重要标志。如同心电图，可通过图上的特征来判断心脏和血液循环系统的健康状态。那么，色谱图的正确解读就可以判断色谱整机的工作状态是否正常。接下来，继续对色谱图上的一些基本概念做一个介绍。了解它们将有助于深入解读色谱图与色谱硬件之间的相互关系。
      基线：在无样品注入色谱柱时，检测器的输出信号随时间变化的曲线轨迹。稳定的基线近似为一条直线，它一般应平行于时间轴。
      基线噪音：指基线的随机波动性。基线信号所产生的波动，通常是因为电子板卡的规律性和随机性扰动；检测器敏感元件规律性和随机性扰动；色谱柱固定相和流动相不稳定性等所致。基线噪音是永远存在且要保持相对稳定性的，若基线噪音过大，表明色谱主机的某些系统状态异常。
      基线漂移：基线偏离相对零点并随时间而产生的缓慢变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
      最小检测质量：检测器恰能辨识出区别于基线噪音的最小进样质量。对于在线色谱来说，进样量的多少正比于定量管容积和待测组份浓度。
      最小检测浓度：在进样量不变的情况下，检测器恰能辨识出区别于基线噪音的某一个样品最低浓度。新的标准规定，峰高要等于基线噪音的3                                    倍，我们可以用信噪比来描述它。
      峰：组份流经检测器时其对应的连续信号产生类似三角形的曲线。正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线。不对称色谱峰有两种，
             前延峰和脱尾峰。
      峰底：基线上峰的起点至终点的距离。
      峰高：峰的最高点至峰底的距离。
      峰宽：峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。峰面积：峰与峰底所包围的面积。
      保留时间：样品注入色谱柱时起，到某一组份溶出色谱柱极大值时所历经的时间。
另外必须要再次重申的是，基于色谱柱和检测器的工作原理，有两个重要的定律，它们决定了组份的定性和定量关系。
      定性依据：在同一个色谱柱和相同测试条件下，每一个组份的保留时间总是相同的。
      定量依据：在标准测试条件下，某一个组份的峰面积总是与它的浓度成正比。

      经过上面的基础知识普及后，接下来我们需要讨论如何正确看待色谱图和如何从色谱图中发现色谱是否存在问题等关键内容。由于色谱图是经色谱各个硬件系统协调工作而最终得出的图形，那么它的完美与否也直接反映了色谱各个硬件系统否在工作正常。我们经常引用美术绘画的审美观来看待色谱图。一个正常的色谱图，应该在视觉上让人看到它的“美”。在审图时，我们需要遵循着以下几个重点：
    1、原始色谱图做对照参考：所谓原始色谱图，是指该色谱出厂时所调试的最佳状态图，它满足色谱的技术规格要求，
         是经过严格测试后的理想状态。原始色谱图通常是一台色谱日常维护的最重要标准和依据。
    2、基线噪音的考量：基线噪音是影响组份峰面积正确计算的主要因素，因此，在被测组份峰前后的基线噪音需要关注。
    3、组份的保留时间与分离度参数的相互关系：色谱图中每一个组份峰的保留时间必须维持基本不变，并且峰与峰之间的
         分离度也必须维持基本不变。
    4、合理的信噪比和较好的重复性：被测组份峰要有足够的信噪比，否则无法确认其浓度的真实性和有效性。被测组份峰在测试
          条件下要保持良好的重复性。
    5、正确的积分事件设定：色谱图需要正确的积分事件来对被测组份峰进行面积积分运算，并最终转换为体积浓度。

         上图为某一在线色谱的运行实例，用于说明色谱图相关细节。
         横坐标：时间轴，左侧起点为-8秒，右侧终点为600秒；基线基本平行于时间轴且始终保持相对平稳；在300~340秒区间有3个峰连体，第一个峰为被测组份，第二个峰非常小，第三个峰略大于第一个峰，由于这3个组份属于同分异构体，分离度很差，在350秒和450秒的峰都是背景组份；在520秒左右为另一个被测组份。
         纵坐标：电压轴，下面起点为-0.1mV，上面终点为0.6mV，当然这仅是谱图中的显示范围，检测器的输出信号需经信号处理板的标准变换后转变的范围为-10V~+10V区间。

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